產品簡介:
本產(chan)品(pin)是利用細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)外(wai)存(cun)在鹽離子濃度差(cha)而導(dao)致細(xi)胞(bao)(bao)膜脹破的(de)原理(li)來裂解無核紅(hong)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)。 本產(chan)品(pin)經(jing)無菌處理(li),主要(yao)用于經(jing)酶消化(hua)分散(san)的(de)組織(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)分離純化(hua),淋巴細(xi)胞(bao)(bao)的(de)分離純化(hua)以及組織(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)蛋白與(yu)核酸提取等(deng)實驗中紅(hong)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)去除。
使用說明:
1. 1倍(bei)體積(ji)的(de)新(xin)鮮(xian)全血,加(jia)入3倍(bei)體積(ji)的(de)紅細胞(bao)裂(lie)解液(ye)。如(ru)1ml新(xin)鮮(xian)全血加(jia)入3ml紅細胞(bao)裂(lie)解液(ye),輕(qing)輕(qing)渦旋或顛(dian)倒混勻。
2. 冰上放置(zhi)15分鐘,其間輕(qing)輕(qing)渦旋混勻兩次(ci),紅(hong)細胞裂(lie)解(jie)后,溶液應該(gai)是清亮透明的。
3. 收集細(xi)胞:4℃,450×g離心(xin)10分(fen)鐘以沉淀白(bai)細(xi)胞,小(xiao)心(xin)吸棄上清液。
4. 向白細(xi)胞沉淀中加(jia)入(ru)兩倍體積(ji)的(de)紅細(xi)胞裂(lie)(lie)解液(ye),輕輕渦旋充分重(zhong)懸白細(xi)胞。如起始血液(ye)為1ml,則加(jia)入(ru)2ml的(de)紅細(xi)胞裂(lie)(lie)解液(ye)。
5. 4℃,450×g離心10分鐘沉淀(dian)白細(xi)胞(bao),小心并徹底吸去上(shang)清液(ye)。 6. 重懸細(xi)胞(bao),用(yong)于后續實驗;如提取RNA,最好(hao)于此步開始使用(yong)DEPC水(shui)配制(zhi)的溶液(ye)進行操(cao)作。 (組織細(xi)胞(bao)處(chu)理:新(xin)鮮組織經(jing)胰酶或膠(jiao)原酶等(deng)消化分散(san)成單個細(xi)胞(bao)懸液(ye),離心棄去上(shang)清液(ye),其余同(tong)上(shang)。)
注意事項:
本(ben)裂解液為無菌(jun)產品,分離細胞用于細胞培養時(shi)請注意(yi)無菌(jun)操(cao)作。
為(wei)了您的安(an)全與健康,請穿實(shi)驗服并戴一次性手(shou)套操作。